流动相吸光度

Topic LCI-USG-0021, Last Updated 02/10/2026

请参阅下表，查看常用流动相在多个波长处的吸光度。

为了降低基线噪音，请谨慎选择流动相。

最适用的流动相是在选定检测波长处为透明的流动相。使用这种流动相，可确保任何吸光度只和样品有关。流动相的吸光度还会降低检测器的线性动态范围，减少量为“自动复零”功能所抵消的光吸收量。流动相的波长、pH 和浓度会影响其吸光度。下表中给出了几个流动相的示例，其中的吸光度基于 10 mm 的光程。

注：运行正相溶剂时，请安装系统适用的 Waters 己烷/THF 转换套件（请参阅 Waters 己烷/THF 兼容性套件）。

注意：如果要在 pH 高于 10 的条件下运行 Alliance iS Bio HPLC System，请务必使用可选的高 pH 套件。如需更多帮助，请联系 Waters。

表 1. 根据空气或水测量出的流动相吸光度
流动相	指定波长 (nm) 处的吸光度 (AU)
流动相	200	205	210	215	220	230	240	250	260	280
溶剂
ACN	0.05	0.03	0.02	0.01	0.01	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A
IPA	1.80	0.68	0.34	0.24	0.19	0.08	0.04	0.03	0.02	0.02
甲醇（已脱气）	1.91	0.76	0.35	0.21	0.15	0.06	0.02	< 0.01	N/A	N/A
甲醇（未脱气）	2.06	1.00	0.53	0.37	0.24	0.11	0.05	0.02	< 0.01	N/A
不含稳定剂的 THF（现制）	2.44	2.57	2.31	1.80	1.54	0.94	0.42	0.21	0.09	0.05
不含稳定剂的 THF（旧制）	> 2.5	> 2.5	> 2.5	> 2.5	> 2.5	> 2.5	> 2.5	> 2.5	2.5	1.45
酸和碱
乙酸，1%	2.61	2.63	2.61	2.43	2.17	0.87	0.14	0.01	< 0.01	N/A
磷酸氢二铵，50 mM	1.85	0.67	0.15	0.02	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
EDTA 二钠，1 mM	0.11	0.07	0.06	0.04	0.03	0.03	0.02	0.02	0.02	0.02
盐酸，0.1%	0.11	0.02	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
磷酸，0.1%	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
三乙胺，1%	2.33	2.42	2.50	2.45	2.37	1.96	0.50	0.12	0.04	< 0.01
三氟乙酸，0.1%	1.20	0.78	0.54	0.34	0.22	0.06	< 0.02	< 0.01	N/A	N/A
缓冲液和盐
醋酸铵，10 mM	1.88	0.94	0.53	0.29	0.15	0.02	< 0.01	N/A	N/A	N/A
碳酸氢铵，10 mM	0.41	0.10	0.01	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
HEPES，10 mM，pH 7.6	2.45	2.50	2.37	2.08	1.50	0.29	0.03	< 0.01	N/A	N/A
MES，10 mM，pH 6.0	2.42	2.38	1.89	0.90	0.45	0.06	< 0.01	N/A	N/A	N/A
磷酸钾，二元碱，(K₂HPO₄)，10 mM	0.53	0.16	0.05	0.01	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
磷酸钾，一元碱 (KH₂PO₄)，10 mM	0.03	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
乙酸钠，10 mM	1.85	0.96	0.52	0.30	0.15	0.03	< 0.01	N/A	N/A	N/A
氯化钠，1 M	2.00	1.67	0.40	0.10	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
柠檬酸钠，10 mM	2.48	2.84	2.31	2.02	1.49	0.54	0.12	0.03	0.02	0.01
甲酸钠，10 mM	1.00	0.73	0.53	0.33	0.20	0.03	< 0.01	N/A	N/A	N/A
磷酸钠，100 mM，pH 6.8	1.99	0.75	0.19	0.06	0.02	0.01	0.01	0.01	0.01	< 0.01
Tris HCl，20 mM，pH 7.0	1.40	0.77	0.28	0.10	0.04	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A
Tris HCl，20 mM，pH 8.0	1.80	1.90	1.11	0.43	0.13	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A
表面活性剂
Brij 35，1%	0.06	0.03	0.02	0.02	0.02	0.01	< 0.01	N/A	N/A	N/A
CHAPS，0.1%	2.40	2.32	1.48	0.80	0.40	0.08	0.04	0.02	0.02	0.01
聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯 (Tween 20)，0.1%	0.21	0.14	0.11	0.10	0.09	0.06	0.05	0.04	0.04	0.03
十二烷基硫酸钠 (SDS)，0.1%	0.02	0.01	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
Triton X-100，0.1%	2.48	2.50	2.43	2.42	2.37	2.37	0.50	0.25	0.67	1.42
Waters PIC 试剂
PIC A，1 样品瓶/L	0.67	0.29	0.13	0.05	0.03	0.02	0.02	0.02	0.02	< 0.01
PIC B6，1 样品瓶/L	2.46	2.50	2.42	2.25	1.83	0.63	0.07	< 0.01	N/A	N/A
PIC B6，低 UV，1 样品瓶/L	0.01	< 0.01	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
PIC D4，1 样品瓶/L	0.03	0.03	0.03	0.03	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02	0.01

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